诸位小伙伴，您是否在卵白免疫钤记时，靠近各式内参抗体而不知所措呢，内参卵白是生物体内管家基因编码的，在多组织中巩固抒发泰國 人妖，用于考据免疫学本质中是否泛泛进行和一种半定量检测卵白抒发的程序对照，那么怎么正确的禁受内参抗体呢！不错从以下几点去参考。 泰國 人妖
一、样本种属起原
1. 哺乳动物组织或着细胞起原的样本，一般禁受β-actin、α-tubulin、GAPDH、Lamin- B、Histone H3、Na+/K+-ATPase。
2. 植物起原样本，一般禁受plant actin、Rubisco等。
3. 其他研究较少见的样本，通过查询相干文件或数据库，禁受合适的卵白算作内参保举ICG网站:_PageICG
二、见解卵白分子量
保证见解卵白分子量与内参收支大于5KDa以上，细心检测时纷扰，举例，见解卵白为40KDa，不宜禁受β-actin（42KDa）作内参，可筹商GAPDH (36KDa) 省略β-tubulin(55KDa)算作内参。
三、内参卵白抒发部位
因此，索取卵白的部位不同，禁受的内参卵白也不同。比如偶而胞质、胞核分开索取而不索取总卵白时，就要禁受相应部位抒发的内参卵白。如 H3在细胞核中高效巩固抒发，表面上在细胞质不抒发，那么关于胞质索取的卵白，就不可选定H3算作内参卵白，而应该禁受细胞质中抒发的β-actin 、GAPDH α-Tubulin等算作内参卵白。（内参评价保举软件geNorm、NormFinder）
持重：使用内参抗体需避让以下情况
亚细胞定位
内参
分子量KDa
持重事项
胞浆、全细胞
β-actin
42
不适用于细胞核索取物，因为β-actin是染色质重塑复合物中的组分;可能不符合于研究对象之间年岁各异大的情况
α-Tubulin
55
可能不符合于研究对象之间年岁各异大的情况，微管卵白的抒发跟着抗菌和抗有丝划分抗性药物而变调，因此在加入抗癌和抗真菌药物时
β-Tubulin
55
GAPDH
36
组织细胞缺氧会引起GAPDH抒发上调，因此不适用于与氧关联的研究，糖尿病等身分会导致 GAPDH的抒发量增高
Vinculin
117
大分子量卵白可参考
线粒体
COXIV 系列
15-17
该系列卵白主要勾搭于15-17KDa，淌若见解卵白分子量接近，可筹商其他内参
HSP60
60
细胞核
VDAC1/2
31-37
该系列卵白主要勾搭于31-37KDa
Lamin B1
66
不是适用于胚胎干细胞，凋一火本质中不符合作念内参
PCNA
36
非升值细胞不适用
TBP
33-43
TBP在东说念主类中是37-43KDa，在小鼠和大鼠中是33-36KDa，不符合凋一火本质
YY1
65-70
Histone H3
17
多量卵白分子量在17KDa傍边，淌若见解卵白分子量接近，可筹商其他内参
全血、血清、血浆
Transferrin
77
抒发情状受某些疾病状态和调养的影响，比如视黄酸
Albumin
66
含量极高，持重裁汰WB本质上样
标签抗体搭配使用服从更佳
在研究卵白相干互相作用等本质中比如pull down， 通过分子生物学期间，表位标签可和会至见解卵白的 N或C 结尾，常用的表位标签有 His、HA、Myc和GST 等。这些表位标签经常不会影响见解卵白的生物活性和细胞内定位。表位标签的出现，为科学研究和工业分娩提供了便捷。
表位标签
标签序列泰國 人妖
分子量
标签抗体
HA 标签
YPYDVPDYA
1.1 KD
HA 标签抗体
Myc 标签
EQKLISEEDL
1.2 KD
Myc 标签抗体
DYKDDDDK
DYKDDDDK
1 KD
DYKDDDDK (FLAG® 表位标签) 抗体
GST Tag
-
26 KD
GST 标签抗体
GFP Tag
-
26.9 KD
绫 丝袜GFP 标签抗体
V5 标签
GKPIPNPLLGLDST
1.4 KD
V5 标签抗体
S-tag
KETAAAKFERQHMDS
1.8 KD
S 标签抗体
E-tag
GAPVPYPDPLEPR
1.4 KD
E 标签抗体
保举产物信息
类型
产物称号
分子量
产物编号
内参抗体
β-actin， Mouse mAb 小鼠抗β-actin单克隆抗体
42 kDa
30101ES
β-actin， Rabbit pAb 兔抗β-actin多克隆抗体
42 kDa
30102ES
GAPDH (Clone:1A6)， Mouse mAb 小鼠抗GAPDH 单克隆抗体
36 kDa
30201ES
GAPDH， Rabbit pAb 兔抗GAPDH多克隆抗体
36 kDa
30202ES
α-Tubulin， Mouse mAb 小鼠抗α-Tubulin单克隆抗体
50-55 kDa
30304ES
β-Tubulin， Mouse mAb 小鼠抗β-Tubulin单克隆抗体
50-55 kDa
30301ES
β-Tubulin， Rabbit pAb 兔抗β-Tubulin多克隆抗体
50-55 kDa
30302ES
类型
产物称号
产物编号
标签抗体
His-tag， Mouse mAb 小鼠抗His-tag单克隆抗体
30401ES
His-tag， Rabbit pAb兔抗His-tag多克隆抗体
30402ES
Flag-Tag (DYKDDDDK)， Rabbit pAb 兔抗Flag-Tag多克隆抗体（DYKDDDDK）
30501ES
小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体（DYKDDDDK） Flag-Tag (DYKDDDDK)， Mouse mAb
30503ES
Myc-tag， Mouse mAb小鼠抗Myc-tag单克隆抗体
30601ES
HA-Tag， Mouse mAb小鼠抗HA-Tag单克隆抗体
30701ES
HA-Tag， Rabbit pAb兔抗HA-Tag多克隆抗体
30702ES
V5-Tag， Mouse mAb小鼠抗V5-Tag单克隆抗体
30801ES
GST-tag， Mouse mAb 小鼠抗GST-tag单克隆抗体
30901ES
GST-tag， Rabbit pAb 兔抗GST-tag多克隆抗体
30902ES
GFP-tag， Mouse mAb 小鼠抗GFP-tag单克隆抗体
31001ES
GFP-tag， Rabbit pAb 兔抗GFP-tag多克隆抗体
31002ES
RFP-tag， Mouse mAb 小鼠抗RFP-tag单克隆抗体
31101ES
MBP-tag， Rabbit pAb 兔抗MBP-tag多克隆抗体
31201ES
相干产物
类型
称号
货号
亲和纯化凝胶
Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel（Anti-Flag亲和纯化凝胶）
20585ES
Anti-HA Affinity Gel （Anti-HA亲和纯化凝胶）
20586ES
Anti-Myc Affinity Gel（Anti-Myc亲和纯化凝胶）
20587ES
Anti-V5 Affinity Gel（Anti-V5标签亲和纯化凝胶）
20588ES
Anti-His Affinity Gel（Anti-His标签亲和纯化凝胶）
20589ES
文件援用：
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